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技術文章/ Technical Articles

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  • 2016

    5-2

    Dmem(A)細胞培養基(粉末型)成分序號化合物名稱含量(mg/L)序號化合物名稱含量(mg/L)1無水氯化鈣.2H2O265.0018L-絲氨酸42.002硝酸鐵.9H2O0.1019L-蘇氨酸95.003氯化鉀400.0020L-色氨酸16.004無水硫酸鎂97.6721L-酪氨酸72.005氯化鈉6400.0022L-纈氨酸94.006無水磷酸二氫鈉109.0023D-泛酸鈣4.007丁二酸75.0024酒石酸膽堿7.208丁二酸鈉100.0025葉酸4.009L-鹽酸...

  • 2016

    4-28

    Q:westernblot中脫脂奶粉封閉的是哪些蛋白?原理是什么?A:脫脂奶粉中主要是乳清蛋白和酪蛋白。原理就是用非抗原的蛋白去封閉膜,避免標記抗體固定在膜上引起背景增高。Q:請問封閉液和抗體稀釋液用BSA和脫脂奶粉有什么區別呢?有人跟我說奶粉的封閉效果更好些,但是通常只能用于WesterBlot,如果要做elisa或者phagedisplay時候,蛋白鋪板的話,不能使用脫脂奶粉。可是也有人說可以,請問是否有這個說法呢?A:所謂封閉是用以減少或消除載體上的非特異性結合蛋白的分...

  • 2016

    4-27

    考馬斯亮蘭G250與蛋白質結合,在0-1000ug/ml范圍內,于波長595nm處的吸光度與蛋白質含量成正比,可用于蛋白質含量的測定。考馬斯亮蘭G250與蛋白質結合迅速,結合產物在室溫下10分鐘內較為穩定,是一種較好的蛋白質定量測定方法。1.實驗部分1.1儀器與試劑:LabtechUVPOWER紫外分光光度計;玻璃比色皿一套;考馬斯亮藍G250;牛血清蛋白;超純水。1.2試液的制備:牛血清蛋白標準溶液(1000ug/ml)的制備稱取100mg牛血清蛋白置100ml容量瓶中,加...

  • 2016

    4-26

    (一)、儀器設備1)18cm不銹鋼高壓鍋或電爐或醫用微波爐;2)水浴鍋(二)、試劑1)pbs緩沖液(pH7.2~7.4):NaCl137mmol/L,KCl2.7mmol/L,Na2HPO44.3mmol/L,KH2PO41.4mmol/L。2)0.01mol/L檸檬酸鹽緩沖液(CB,pH6.0,1000ml):檸檬酸三鈉3g,檸檬酸0.4g。3)0.5mol/LEDTA緩沖液(pH8.0):700ml水中溶解186.1gEDTA·2H2O,用10mmol/LNaOH調至pH...

  • 2016

    4-25

    三月二十日,來自中科院廣州生物醫藥與健康研究院、武漢菲沙基因信息有限公司(Frasergen)和加拿大西蒙佛雷澤大學的研究人員,在學術期刊《JournalofBioLogicalChemistry》發表學術論文,該研究檢測了iPSC生成及隨后基因校正過程中的基因組不穩定性,指出重編程和基因打靶可能會產生大量但卻不同的基因組變化,因此,在iPSC誘導時及基因打靶之后,必須進行嚴格的基因組監控和選擇。本文通訊作者是中科院生物醫藥與健康研究院研究員潘光錦博士,其2002年碩士畢業于...

  • 2016

    4-23

    關于293/293T細胞1、種屬都為人,不是鼠。2、來源:293細胞是轉染腺病毒E1A基因的人腎上皮細胞系,293T細胞由293細胞派生,同時表達SV40大T抗原,含有SV40復制起始點與啟動子區的質粒可以復制。用Ca3(PO4)2轉染效率可高達50%。蛋白表達水平高,轉染后2-3天用堿性磷酸酶分析可較容易地檢測到表達的蛋白。瞬時轉染293T細胞是過表達蛋白并獲得細胞內及細胞外(分泌的或膜)蛋白的便捷方式。3、形態為上皮細胞,能致瘤。4、染色體核型:亞三倍體人細胞系。染色體眾...

  • 2016

    4-22

    一、免疫組化技術的基本原理應用免疫學及組織化學原理,對組織切片或細胞標本中的某些化學成分進行原位的定性、定位或定量研究,這種技術稱為免疫組織化學技術或免疫細胞化學技術。*,抗體與抗原之間的結合具有高度的特異性。免疫組化正是利用這一特性,即先將組織或細胞中的某些化學物質提取出來,以其作為抗原或半抗原去免疫小鼠等實驗動物,制備特異性抗體,再用這種抗體(*抗體)作為抗原去免疫動物制備第二抗體,并用某種酶(常用辣根過氧化物酶)或生物素等處理后再與前述抗原成分結合,將抗原放大,由于抗體...

  • 2016

    4-20

    實驗原理:PCR擴增是模擬天然DNA復制過程,利用DNA聚合酶在體外(試管中)擴增一對引物之間特異性DNA片段的方法。其主要熱循環過程可分為三個步驟:(1)高溫變性(denature):提供DNA復制的有效模板。(2)低溫退火(anneal):引物與模板DNA復性,提供游離3’-OH端供DNA復制起始;(3)中溫延伸(extend):依賴Mg2+,DNA聚合酶催化合成與模板互補的新的DNA分子。以上變性、退火、延伸三個過程組成一個循環周期;常循環25~40周期,經過n輪循環后...

  • 2016

    4-19

    如今,幾乎每位研究人員都或多或少地知道生成誘導多能干細胞(iPSC)的配方。拿出體細胞,加入四種轉錄因子,等待幾個星期,搞定!不過,這其中到底發生了什么,卻是一個謎,人們想了解卻還未了解。顯然,這涉及到表觀遺傳學:從成纖維細胞轉變成iPSC,意味著那些過去關閉的基因必須再次啟動。其他基因,比如細胞分化的標志,則必須調低。西奈山醫院Lunenfeld-Tanenbaum研究所的資深科學家AndrasNagy談道:“每個細胞的基因組都幾乎是相同的。表觀基因組哪些基因表達,哪些蛋白...

  • 2016

    4-18

    G-protein-coupledreceptors(GPCRs)areactivatedbyawidevarietyofexternalstimuli.UponreceptoractivationtheG-proteinexchangesgdpforGTP,causingthedissociationoftheGTP-boundGalphaandtheGbetagammasubunits,triggeringdiversesignalingcascades.Receptor...

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