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雙PAG免疫金銀染色原理(一)染色流程：(1)石蠟切片常規脫蠟至水，0.05mol/L(pH7.4)TBS洗3×3min.(2)0.1%胰蛋白酶37℃消化20min,或抗原修復20min(98℃)，自然冷卻至室溫。(3)0.05mol/L(pH7.4)TBS洗3×3min.(4)1%EA(卵蛋白)15min,不洗。(5)適當稀釋的特異抗體室溫4h或4℃孵育20h,或37C孵育30min.(6)0.05mol/L(pH7.4)TBS洗3×5min.(7)0.02mol/L(pH...

抗體藥物作為生物技術產業的關鍵驅動力，能安全有效地對癌癥、自身免疫病和感染性疾病等進行靶向治療，該藥物在2012年創下645.7億美元的銷售額，占生物制藥51.8%的份額。目前抗體藥物的市場需求量仍在攀升，預計到2015年，抗體藥物銷售額有望達980億美元左右。業內人士認為，隨著疾病譜變化，抗體藥物的黃金時代已經來到。單抗藥物的作用靶點很重要的一部分是行使細胞功能*的跨膜蛋白，包括多通道膜蛋白MMP(如g蛋白偶聯受體)和離子通道，這些蛋白也是診斷檢測的重要分析靶點。目前跨膜蛋...

一、目的通過氨基酸的分離，學習紙層析法的基本原理及操作方法。二、原理紙層析法是用濾紙作為惰性支持物的分配層析法。層析溶劑由有機溶劑和水組成。物質被分離后在紙層析圖譜上的位置是用Rf值(比移)來表示的：R=原點到層析點中心的距離原點到溶劑前沿的距離在一定的條件下某種物質的Rf值是常數。Rf值的大小與物質的結構、性質、溶劑系統、層析濾紙的質量和層析溫度等因素有關。本實驗利用紙層析法分離氨基酸。三、器材1、層析缸①2、毛細管3、噴霧器4、培養皿5、層析濾紙(新華一號)四、試劑1、擴...

T細胞受體(Tcellreceptor，TCR)是T細胞表面特異性識別抗原和介導免疫應答的分子，是人類基因組中多態性zui高的區域之一，決定著人的免疫系統如何適應環境的變化。T細胞受體庫的多樣性(包括基因重組以及選擇性表達)直接反映了機體免疫應答的狀態。TCR可分為TCRα/β和TCRγ/δ兩種類型,外周血T細胞主要為TCRα/β的T細胞,是介導機體特異性細胞免疫反應的主要細胞。如圖1所示：TCRβ基因由可變區(V)、多變區(D)、結合區(J)和恒定區(C)四部分基因片段組成...

實驗室離心機離心管種類有多種。1、按材質可分：塑料離心管、玻璃離心管和不銹鋼離心管等。2、按速度可分：低速離心管和高速離心管。3、按容量可分：微量離心管、小容量離心管和大容量離心管。一般稱容量大于100mL的離心管為離心瓶。4、按離心管口部形狀可分：縮口離心管和直口離心管。5、按離心管底部形狀可分：圓底離心管、尖底離心管和平底離心管。6、按離心管與蓋接合形式可分：摁蓋離心管和螺口離心管。7、按用途可分：制備型離心管和分析型離心管。elisa試劑盒,進口elisa試劑盒,國產e...

增加PCR的特異性：1.primersdesign這是zui重要的一步。理想的，只同目的序列兩側的單一序列而非其它序列退火的primer要符合下面的一些條件1)足夠長,18-24bp,以保證特異性.當然不是說越長越好,太長的primer同樣會降低特異性,并且降低產量2)GC%40%~60%3)5'端和中間序列要多GC,以增加穩定性4)避免3'端GCrich,zui后3個BASE不要有GC,或者zui后5個有3個不要是GC(有人說：3'端是GC/CG/CC/GG。)5)避免3'...

細胞培養是實驗室里zui常見和zui基本的實驗了，但卻不是zui簡單的。別小看細胞培養，這里可蘊含著大學問。有時候細胞狀態不好，轉染、藥篩這些實驗根本就沒辦法做。影響細胞培養的因素很多，讓我們先從培養基和血清說起。經典的培養基有很多種，Invitrogen(GIBCO)、thermofisher(HyClone)、Sigma等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI1640、MEM、DMEM/F12都是應用zui廣泛的培養基。其他如M199、IMDM、L15培養基等也用于某些細...

生物信息學主要應用到HMM隱馬可夫鏈的方法。數學中具有馬爾可夫性質的離散時間隨機過程。該過程中，在給定當前知識或信息的情況下，只有當前的狀態用來預測將來，過去(即當前以前的歷史狀態)對于預測將來(即當前以后的未來狀態)是無關的。在馬爾可夫鏈的每一步，系統根據概率分布，可以從一個狀態變到另一個狀態,也可以保持當前狀態。狀態的改變叫做過渡，與不同的狀態改變相關的概率叫做過渡概率。隨機漫步就是馬爾可夫鏈的例子。隨機漫步中每一步的狀態是在圖形中的點，每一步可以移動到任何一個相鄰的點，...

如今，幾乎每位研究人員都或多或少地知道生成誘導多能干細胞（iPSC）的配方。拿出體細胞，加入四種轉錄因子，等待幾個星期，搞定！不過，這其中到底發生了什么，卻是一個謎，人們想了解卻還未了解。顯然，這涉及到表觀遺傳學：從成纖維細胞轉變成iPSC，意味著那些過去關閉的基因必須再次啟動。其他基因，比如細胞分化的標志，則必須調低。西奈山醫院Lunenfeld-Tanenbaum研究所的資深科學家AndrasNagy談道：“每個細胞的基因組都幾乎是相同的。表觀基因組哪些基因表達，哪些蛋白...

血管生成的分期及特征新形成的毛細血管由內皮細胞和外皮細胞組民，這兩種細胞有形成完整的毛細血管網的能力。在體內，伴隨促分化的信號轉導，血管生成按內皮細胞激活、增殖、遷徙和管腔形成過程進行。如缺氧等影響腫瘤細甩的內源性或外源性因素促發細胞因子的釋放。靜止的內皮細胞受宿主或腫甩釋放的細胞因子激活(Ⅰ期)，特定的細胞增殖(Ⅱ期)，并沿血管生成刺激源的纖維網絡移動，形成排列細胞索(Ⅲ期)，zui后血管芽形成管腔樣結構，細胞退出細胞周期后進入靜止期。通過細胞間起粘附接觸作用的細胞內小泡的...