核準和修改日期：2008年08月20日

碘[¹²⁵I]睪酮放射免疫分析藥盒說明書

【藥品名稱】

通用名：碘[¹²⁵I]睪酮放射免疫分析藥盒

英文名：Iodine[¹²⁵I] Testosterone Radioimmunoassay Kit

漢語拼音：Dian [¹²⁵I] Gaotong Fangshemianyifenxi Yaohe

【成分】

【性狀】液體組分(免疫分離劑除外)應澄清，無沉淀或絮狀物；凍干組分應呈疏松狀，復溶后應無沉淀或絮狀物。

【放射性核素半衰期】本品所用核素為碘[¹²⁵I]，其物理半衰期(T1/2)為60天。

【研究意義】

睪酮（testosterone, T）是一種19碳甾體激素，分子量288D，男性主要由睪wan間隙細胞分泌，少量來自腎上腺皮質；女性主要由腎上腺網狀帶分泌。睪酮是雄激素中活性zui強的一種激素，其主要生理作用系維持男性第二性征和正常性腺功能，維持女欲以及促進蛋白質合成代謝等。

本藥盒主要用于血清中睪酮含量的測定，對男性性早熟、男性性功能低下、陽萎、睪wan發育不全、睪wan細胞瘤、女性特發性多毛癥以及Cushing氏綜合征等內分泌疾病的診斷均有重要意義。

血清T增高常見于：睪wan良性間質細胞瘤、先天性腎上腺皮質增生癥、真性性早熟癥、皮質醇增多癥、女性男性化腫瘤、女性特發性多毛癥、多囊卵巢綜合癥、注射睪酮或促性腺激素、肥胖以及中晚期孕婦等。

血清T降低常見于：男性性功能低下、原發性睪wan發育不全性幼稚、垂體功能減退、系統性紅斑狼瘡（陽性率約50%）、陽萎、骨質疏松癥、垂體性矮小癥、甲狀腺功能減低、高PRL血癥、部分男性乳房發育、外傷后性功能減退、隱睪炎等。

【測定原理】

本藥盒采用競爭放射免疫分析法，即標準或待測樣品中的T和¹²⁵I-T共同與*的特異性睪酮抗體在適宜的條件下進行競爭性結合反應。一部分¹²⁵I-T與抗體結合形成復合物，而另一部分呈游離狀態。¹²⁵I-T與抗體結合的比例取決于標準或待測樣品中非標記T的含量，非標記T的含量越高，¹²⁵I-T與抗體形成復合物越少；非標記T的含量越低，¹²⁵I-T與抗體形成復合物越多。抗原-抗體復合物用免疫分離劑沉淀下來，測定沉淀物的放射性計數。經過適當的數據處理后可獲得標準曲線，從標準曲線上查出被測樣品的睪酮含量（數據可由計算機自動處理）。

【適用儀器】適用于各類ν-放射免疫分析儀。

【樣本要求】

取靜脈血分離血清，待測；如不立即測量，可將樣品密封后，置于2~8℃或-20℃儲存備測，2~8℃保存不應超過1周，-20℃保存不超過2個月。冰凍樣品在保存過程中應避免反復凍融。冰凍樣品測定前，將樣品置于室溫或常溫水中融化，并充分搖勻!

【用法用量】

1 試劑配制、使用方法和保存

.1 T標準品：淡黃色液體，直接使用。濃度依次為：0、0.1、0.5、2、8、20ng/ml，2~8℃保存42天內穩定；-20℃冷凍保存，標識的有效期內穩定，應避免反復凍融。

1. ¹²⁵I-T：紅色液體，直接使用。含1~3μCi  ¹²⁵I標記的19位睪酮衍生物，2~8℃保存，標識的有效期內穩定。
2. 兔抗-T抗體：藍色液體，直接使用。2~8℃保存，標識的有效期內穩定；開封后42天穩定。
3. 驢抗兔免疫分離劑：液體，加樣前充分搖勻。2~8℃保存標識的有效期內穩定。開封后45天內穩定。
4. T質控血清：淡黃色液體，直接使用。2~8℃保存42天內穩定，―20℃冷凍保存標識的有效期內穩定，應避免反復凍融。附值見質控血清使用說明書。

2測定步驟

取圓底聚苯乙烯試管若干，用記號筆或特殊鉛筆編號NSB、S₀-S₅和待測樣品管等，然后用微量加樣器按下表加樣。加樣前所有試劑（尤其分離劑！）包括待測樣品要搖勻，并且平衡到室溫。

加樣順序表：                            單位：μl

3數據處理

1. 聯機處理: 由電腦自動處理得出結果。注意放射免疫方法和免疫放射方法由于原理不同，處理軟件也不一樣，用戶一定要使用適合的處理軟件進行數據處理。在此建議用戶使用log-logit或四參數數據處理模式。
2. 手工作圖或計算器處理:
   1.  百分結合率計算：設S₀管計數為B₀，各標準管或樣品管計數為B，非特異管計數為NSB，則百分結合率計算公式為B/ B₀=(B－NSB)/( B₀－NSB)×100%

3.2.2 logit計算：各標準點或樣品管的logit值計算公式為logit=ln[(B/ B₀)/(1－B/ B₀)]

3.2.3 手工作圖：以標準濃度取log值為橫坐標，對應的logit值為縱坐標在普通坐標紙上或以標準濃度為橫坐標，對應的B/B₀為縱坐標在log-logit坐標紙上畫出標準曲線（理想化時是一條直線）。根據待測樣品的B/B₀可以從坐標紙上查出樣品的濃度值。注意：如果使用普通坐標紙，查出的數值應取反對數才是zui后的濃度值。

3.2.4計算器處理：使用有線性擬合功能的計算器，可以比較方便地計算出樣品濃度值，具體操作方法請查閱計算器的使用說明書。

3.3 尿液中睪酮的測定方法及數據處理

3.3.1收集24小時尿，量總體積，混勻后取尿液0.2ml，加 0.25N鹽酸0.8ml，于30℃水浴水解20~24小時，以此水解尿作為測定樣品。

3.3.2取水解尿樣品25μl，加到樣品管中，用緩沖液（此緩沖液為睪酮水解尿）補到50ul即加25ul測尿緩沖液。該緩沖液為0.24M Triss溶液，其作用是將強酸性的水解尿樣品調整為接近中性，否則會使測定值嚴重失真（偏高）！，

3.3.3 24小時睪酮尿含量的計算：

尿液濃度= A·V₁/V₂·50/V₃ ng/ml=10A ng/ml

24小時尿中睪酮總量=A·V₁/V₂·50/V₃·Dng=0.01A·Dμg

其中： A—從標準曲線上查得睪酮的濃度（ng/ml）

V_1——水解尿的總體積（1ml）

V_2——被水解的尿體積（0.2ml）

V_3——水解尿加入的體積（25μl）

50為加入測量管中水解尿與緩沖液的總體積

D—24小時總尿量（ml）

    例如：某正常人24小時總尿量為2000ml，在標準曲線上查出濃度為3.8ng/ml，則：

尿液濃度=10×3.8ng/ml=38ng/ml。

24小時尿中睪酮總量=0.01×3.8×2000μg =78μg。

3.4 標準曲線舉例（僅供參考，不得用于實際計算）。濃度單位ng/ml

【參考正常值】

下列所提供的數據僅供參考，每個實驗室都應根據本實驗室的條件及接觸的人群建立自己實驗室睪酮的正常值范圍。

1．科研血清睪酮參考正常值：                  （單位：ng/ml）

1. 尿液中睪酮參考正常值：

      成年男性：47~117μg/24小時尿；

      成年女性：0.5~12μg/24小時尿。

1. 唾液中睪酮參考正常值：　

成年男性：0.15~0.25ng/ml；

成年女性：卵泡期0.08~0.13ng/ml，排卵期0.24~32ng/ml，黃體期0.11~0.15ng/ml。

單位換算：1 ng/ml =100ng/dl=1000ng/l=1μg/l=3.46nmol/l

由于地區及使用儀器不同，所測的正常值會存在一定的差異，所以本說明書提供的正常值僅作參考。各實驗室能建立符合本實驗室要求的正常值范圍。

【產品性能指標】

1. 測定范圍：0.1~20ng/ml；
2. 靈敏度：0.02ng/ml；
3. 精密度：批內變異CV<10%；批間變異CV<15%。
4. 特異性：19位睪酮抗體與下列睪酮類似物的交叉反應率如下：

       雙氫睪酮     1.1×10^-2%        雌二醇     2.1×10^-2%

     雌 三 醇     2×10^-15%         孕  酮     3.2×10^-2%

     雄烯二酮     1.2×10^-5%

5．使用期限：見產品外包裝。

【禁忌】本品僅供體外診斷用!
【注意事項】

1. 收到試劑盒后，盡快存放在2~8℃。
2. 使用前請詳細閱讀此說明書。
3. 當樣品中睪酮濃度高于20ng/ml時，可將樣品用“0”標準或較低含量的女性血清稀釋5~10倍后復測，測定濃度乘以稀釋倍數即為樣品濃度。
4. 不同藥盒或不同月份的同種藥盒的組分不得混用。
5. 吸棄上清液時，注意不得損失沉淀物，否則將明顯影響測定結果。
6. 藥盒請在有效期內使用。
7. 研究標本均應視為有潛在傳染性，請按傳染病實驗室規程操作。
8. 使用本藥盒應注意放射防護，放射性廢棄物須按放射防護條例規定處理。
9. 使用本品的操作人員應經過專業技術培訓。

【貯藏】2～8℃保存。