WB實驗代測

上海信帆生物提供WB實驗代測服務，代測時間為7-10天，提供實驗數(shù)據(jù)，包括所有試劑，提供分析數(shù)據(jù)、步驟等，如果你想了解該實驗服務的詳細信息，咨詢！

產(chǎn)品型號：
廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家
更新時間：2022-05-23
訪問量：32319

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聯(lián)系電話：13764793648

詳細介紹

所有產(chǎn)品僅供科研使用，不能用于食用和醫(yī)療等

Western Blotting檢測,WB實驗代測，WB實驗服務

Western blot樣本要求

客戶需新鮮或正確保存的蛋白樣品，檢測目的蛋白的一抗（或由本公司代購）。樣品要求為：

1、裂解樣品總蛋白量>500ug/樣品。

2、細胞樣品總蛋白濃度>1mg/ml。

3、組織樣品總蛋白濃度>10-15mg/ml。

Western blot結果及數(shù)據(jù)提供

內(nèi)參蛋白和目的蛋白曝光膠片各一張，可提供掃描圖，實驗報告，包括整個試驗流程所涉及的實驗數(shù)據(jù)和實驗步驟。如需進行蛋白純化服務，將提供檢測報告

WB實驗代測

服務內(nèi)容

我們提供從蛋白制備、蛋白電泳到Western blot檢測的全流程服務，如需要還可進行灰度分析。

說明

1、建議提供目的蛋白陽性表達樣品（純蛋白或有陽性表達的細胞或組織）作為陽性對照。

2、每張膜檢測1-8個樣品。

3、如果一抗由客戶提供，請在正確條件下保存，避免污染及反復凍融。

關于Western blot實驗異常分析

『無信號』

原因	建議
一抗與二抗不匹配	選擇針對一抗來源種屬制備的二抗；
一抗不識別目的的種屬的蛋白	1)檢查抗體的說明書，適用范圍內(nèi)是否包含目的種屬 2)使用陽性對照來檢查抗體質(zhì)量
一抗或二抗不足，沒有足夠的抗體結合到目的蛋白	1)降低抗體稀釋倍數(shù)，增加抗體濃度 2)延長孵育時間
封閉劑與一抗有交叉反應	改變封閉劑
抗原不足	1)每個泳道加入20-30ug總蛋白 2)制備樣品要使用蛋白酶抑制物及使用陽性對照
在檢測的組織內(nèi)目的蛋白表達水平低	檢測樣本不表達目的蛋白選擇表達量高的細胞作為陽性對照，用于確定檢測樣本是否為陰性，也可更換細胞系
蛋白轉(zhuǎn)膜效率低	1)利用麗春紅檢測轉(zhuǎn)膜效率;檢查轉(zhuǎn)移裝置是否電極弄反 2)轉(zhuǎn)移前膜是否用甲醇侵泡過
膜過渡洗滌	減少洗滌時間和強度
疊氮鈉抑制二抗活性	二抗稀釋液內(nèi)不用疊氮鈉

『沒有特異條帶』

原因	建議
細胞系傳代過多后蛋白表達譜發(fā)送變化	1)使用未傳代或傳代次數(shù)較少的細胞系進行樣品制備
蛋白本身有很多修飾	1)查閱文獻，確定目的蛋白是否存在多種修飾
蛋白被消化或者降解	1)蛋白樣品確保未被污染，確保含有蛋白酶抑制劑
所檢測蛋白存在多種剪接體，導致分子量大小不同	1)查閱文獻或者通過搜索數(shù)據(jù)庫來確定該蛋白是否存在多種長度不同的編碼mRNA
一抗或二抗?jié)舛雀?/span>	1)減低抗體濃度
洗滌不夠	1)充分洗滌

『條帶大小不正確』

原因	建議
目的蛋白被降解	確保蛋白樣品未被污染，確保含有蛋白酶抑制劑
存在不同的剪接體	查閱文獻或者通過搜索數(shù)據(jù)庫來確定該蛋白是否存在多種長度不同的編碼mRNA
重組蛋白	檢測是否存在額外加入的蛋白
特殊蛋白如MDM2等	仔細閱讀抗體說明書

尊敬的客戶：
本公司有放射免疫技術服務、蛋白質(zhì)組學服務、免疫組化、PCR技術服務、生物信息學數(shù)據(jù)分析等，如果您想了解Western blot的更多內(nèi)容或者其他服務信息，您可以本公司的了解更多產(chǎn)品的詳細信息，至善至美的服務是我們永無止境的追求，歡迎新老客戶放心選購自己心儀產(chǎn)品，我們將竭誠為您服務！

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